产品货号:
GS0129
中文名称:
Top10感受态细胞
英文名称:
Top10 Competent Cells
产品规格:
10×100μL|20×100μL|100×100μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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TOP10感受态细胞是目前最常用的感受态细胞,生长速度快,转化效率高,recA1和endA1的突变有利于DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。特殊工艺制作的TOP10感受态细胞经pUC19质粒检测转化效率高于108 cfu/μg。本制品是大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。TOP10是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测,转化率可达到108 cfu/μg,适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。该细胞具有硫酸链霉素(StrR)抗性。
组分 | 10×100μL | 20×100μL | 100×100μL |
Top10感受态细胞 | 10×100μL | 20×100μL | 100×100μL |
说明书 | 1份 |
保存:-80℃,有效期6个月。
基因型
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR)endA1 nupG
- 感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可多次冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
- 所有步骤均在无菌条件下操作。
- 使用1ng的质粒DNA进行转化时:100μL E.coli TOP10 Competent Cells/1ng pUC19 Plasmid进行转化时产生的菌落数>107~108 transformants/1μg pUC 19 Plasmid。
- 100μL的E.coli TOP10 Competent Cells在含有100μg/mL Ampicillin的L-琼脂平板培养基上过夜培养40 hr不产生菌落。
- 从-80℃冰箱内取出E.coli TOP10 Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。
- 加入DNA样品轻轻混匀,冰中放置30分钟。
- 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中放置2分钟左右,注意不要晃动。添加700μL不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。
- 37℃振荡培养1小时(160~225rpm),吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
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